小麦农杆菌转化

  • 基因型:科农199;陇春23;Bobwhite 等
  • 外植体类型:未成熟胚及其诱导出的胚性愈伤组织
  • 传送介质:Agrobacterium tumefaciens
  • 筛选:the bar gene/ PPT; the hpt gene/ hygromycin
  • 产品:T0代转基因植株;T1代种子
  • 转化流程:Download小麦农杆菌转化流程图

小麦农杆菌转化流程图

A:共培养阶段
B:共培养后未成熟胚的GUS瞬时表达情况
C:侵染后诱导出的胚性愈伤组织
D:愈伤诱导阶段生长3周后的GUS瞬时表达情况
E:见光两周后愈伤组织的再生情况
F:见光四周后愈伤组织的再生情况,抗性植株被筛选出来
G:转化12周后获得抗性植株,可直接取样检测或移栽进入温室
H:温室生长2个月后的转基因植株,均能正常结实
I:转基因植株叶片部分的GUS稳定表达情况
J:转基因植株花器官部分的GUS稳定表达情况,证明转化基因可以正常传代。

转化效率:~10%(以科农199未成熟胚为例)
转化效率=(PCR阳性植株数/侵染的外植体数)×100%

 

小麦农杆菌遗传转化流程图

小麦农杆菌遗传转化流程图