小麦基因枪转化

  • 基因型:科农199;陇春23;石4185;晋麦45;扬麦19等超过30个中国主栽小麦品种
  • 外植体类型:未成熟胚或者未成熟/成熟胚诱导的愈伤
  • 传送介质:BioRad PDS 1000/He基因枪系统
  • 筛选:the bar gene/ PPT; the hpt gene/ hygromycin
  • 产品:T0代转基因植株;T1代种子
  • 转化流程:Download小麦基因枪遗传转化

小麦基因枪转化流程图

A:以成熟胚诱导的胚性愈伤组织为外植体进行基因枪轰击
B:轰击24h后未成熟胚的GUS瞬时表达情况
C:轰击24h后愈伤组织的GUS瞬时表达情况
D:见光两周后愈伤组织的再生情况
E:见光四周后愈伤组织的再生情况
F:转化10周后获得抗性植株,可直接取样检测或移栽进入温室
G:温室生长2个月后的转基因植株,均能正常结实
H:转基因植株叶片部分的GUS稳定表达情况
I:利用Ubi启动的GFP基因对小麦未成熟胚进行轰击,获得转基因植株叶片部分的GFP稳定表达情况。
转化效率:~20%(以科农199未成熟胚为例)
转化效率=(PCR阳性植株数/轰击的外植体数)×100%

 

小麦基因枪遗传转化流程图